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數(shù)字PCR（Digital PCR，dPCR）實(shí)驗(yàn)介紹

原理：是一種近年來興起的核酸分子絕對(duì)定量分析技術(shù)，數(shù)字PCR的面世解決了多年來qPCR一直沒有解決的問題，首先是數(shù)字PCR檢測(cè)靈敏度極高，可以檢測(cè)單個(gè)核酸分子，另外就是數(shù)字PCR并不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的絕對(duì)定量。數(shù)字PCR系統(tǒng)可將PCR反應(yīng)體系均勻分割成數(shù)萬個(gè)反應(yīng)微滴，每個(gè)微滴平行、獨(dú)立完成PCR擴(kuò)增，通過判定每個(gè)微滴擴(kuò)增完成后熒光信號(hào)的有無進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，最后根據(jù)泊松分布公式計(jì)算得到原體系中靶標(biāo)基因的初始濃度或拷貝數(shù)。數(shù)字PCR系統(tǒng)可應(yīng)用在：腫瘤液體活檢、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷、病原微生物檢測(cè)、病毒載量測(cè)定、拷貝數(shù)變異、稀有突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因檢測(cè)、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證等領(lǐng)域。

熒光定量PCR&數(shù)字PCR(ddPCR)區(qū)別：

實(shí)驗(yàn)流程：

確認(rèn)基因信息，制定實(shí)驗(yàn)方案----DNA/RNA提取，質(zhì)檢----探針設(shè)計(jì)合成----上機(jī)擴(kuò)增，讀取結(jié)果----分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果----發(fā)送檢測(cè)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析

樣本保存運(yùn)輸要求：

1，血液樣品：抗凝血＞0.5 ml，樣品采集后于-20°C 保存

2，動(dòng)植物組織樣品：新鮮組織（-80°C 保存）或石蠟包埋的組織或95%乙醇中固定的組織，大于100 mg

需要確認(rèn)的信息如下：

1、具體檢測(cè)什么樣本?什么種屬？

2、檢測(cè)指標(biāo)是哪些？  

3、是否提供陰性對(duì)照？  

4、探針和引物客戶是否提供？